接着細胞の培地交換

最初に

ここでは接着細胞の培地交換を記載していきます。

必要な培地、試薬

• 培地(DMEM + 10%FBS + 1%P/S, 「培地の調製」で調製したもの)
• D-PBS(-)(細胞培養グレードの市販品を推奨)

必要な機器

• ウォーターバス
• クリーンベンチ
• ピペッター(電動を推奨)
• ピペット(10 mL用)
• 培地吸引機
• 倒立顕微鏡
• インキュベータ

 プロトコル

1. インキュベータからdishを取り出し、倒立顕微鏡で細胞の状態を確認し、インキュベータに戻す。
2. ウォーターバスを37℃に設定し、培地及びD-PBS(-)を30分程度温め、70%エタノールで消毒後、クリーンベンチ内にいれておく。
3. dishを70%エタノールで消毒後、クリーンベンチ内にいれる。
4. 培養してきた培地をdishから全量、吸引除去後、1.で温めたD-PBS(-)を10 mLとり、dishに添加する。
5. 添加後、D-PBS(-)をdishから全量、吸引除去する。
6. 1.で温めたD-PBS(-)を10 mLとり、dishに添加する。
7. 倒立顕微鏡で細胞を確認する。